Estudo da conservação de material biológico com a tecnologia Fta-card® / Study on the conservation of biological material with Fta-card® technology / Estudio de conservación de material biológico con la tecnología Fta-card®

O Whatman FTA-Card® é um papel-filtro quimicamente tratado, destinado à coleta, transporte, armazenamento de amostras para posterior extração de ácidos nucléicos. A tecnologia FTA-Card® é utilizada para manter estável DNA e RNA em temperatura ambiente, podendo ser utilizados para fixação de uma ampla variedade de material orgânico ou tecidos. Foram realizados testes para certificar sua eficiência na conservação do material a ser analisado com o intuito de eliminar a cadeia fria de conservação, agilizando o processo e diminuindo os custos da execução de exames moleculares associados ao diagnóstico de patologias. Foram testadas oito amostras de felinos na forma de sangue total e soro, para a extração utilizou-se o kit Magazorb RNA Total mini-prep kit (Promega®, EUA), para o diagnóstico foi utilizada a técnica de PCR em tempo real para amplificar o gene CI2 de mamíferos, a fim de visualizar a eficácia na conservação de ácidos nucleicos. A utilização desse método torna possível que o material biológico seja enviado por serviços de transporte postais, reduzindo os custos e viabilizando diagnósticos provenientes de áreas mais remotas.(AU)

Whatman FTA-Card® is a chemically treated filter paper intended for the collection, transport, and storage of samples for later extraction of nucleic acids. FTA-Card® technology is used to keep DNA and RNA stable at room temperature and can be used to fix a wide variety of organic material or tissues. Tests were carried out to certify its efficiency in the conservation of the material to be analyzed in order to eliminate the cold conservation chain, speeding up the process and decreasing the costs of performing molecular tests associated with the diagnosis of pathologies. By using this method, biological material can be sent by postal transport services, reducing costs and making diagnoses from more remote areas feasible. Samples of feline specimens were tested in the form of whole blood and serum, using the Magazorb RNA Total mini-prep kit (Promega®, USA) for the extraction. Diagnosis was performed using real-time PCR technique to amplify the mammalian CI2 gene in order to visualize the effectiveness in conserving nucleic acids.(AU)

Whatman FTA-Card® es un papel de filtro tratado químicamente, destinado a la recogida, transporte, almacenamiento de muestras para su posterior extracción de ácidos nucleicos. La tecnología FTA-Card® se usa para mantener el ADN y el ARN estables a la temperatura ambiente y se puede usar para la fijación de una amplia variedad de materiales o tejidos orgánicos. Se realizaron pruebas para certificar su eficiencia en la conservación del material a analizar con el fin de eliminar la cadena de frío de conservación, agilizando el proceso y reduciendo los costos de realización de pruebas moleculares asociadas al diagnóstico de patologías. Se analizaron ocho muestras felinas en forma de sangre total y suero, para la extracción se utilizó el mini-prep kit Magazorb RNA Total (Promega®, USA), para el diagnóstico se utilizó la técnica de PCR en tiempo real para amplificar el CI2 de mamífero gen, con el fin de visualizar la efectividad en la conservación de ácidos nucleicos. El uso de ese método permite el envío de material biológico por los servicios de transporte postal, lo que reduce los costes y permite realizar diagnósticos desde zonas más remotas.(AU)

'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' and tick-borne pathogens screening in white-eared opossums (Didelphis albiventris) from Curitiba and Foz do Iguaçu Cities, Paraná State, southern Brazil / 'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' e triagem para patógenos transmitidos por carrapatos em gambás de orelha branca (Didelphis albiventris) das cidades de Curitiba e Foz do Iguaçu, Estado do Paraná, sul do Brasil

Abstract Hemoplasmas are epierythrocytic bacteria that infect mammals. 'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' was detected in white-eared opossums (Didelphis albiventris) from southern and central-western Brazil. The present study aimed at: i) screening opossums for tick-borne (TBP) pathogens (Piroplasmida and Anaplasmataceae) and ii) detecting and characterizing hemoplasma species infecting opossums from Curitiba and Foz do Iguaçu cities in the Paraná State, southern Brazil. Thirty blood samples from white-eared opossums were evaluated by PCR assays. Animals were not infested by ectoparasites. The mammalian endogenous gapdh gene was consistently amplified in all samples. All opossums tested negative for Theileria/Babesia spp. and Ehrlichia/Anaplasma spp. by PCR based on 18S rRNA and 16S rRNA genes, respectively. A genus-specific PCR assay based on the 16S rRNA gene of hemoplasmas showed that three/13 (23.08%; CI 95%: 8.18-50.26%) opossums from Foz do Iguaçu were positive for hemotropic Mycoplasma sp. All opossums from Curitiba tested negative for hemoplasmas. Sequencing of both the 16S and 23S rRNA genes revealed that the animals were infected by 'Ca. M. haemoalbiventris'. Although 'Ca. M. haemoalbiventris' is prevalent in opossums in Brazil, clinical signs associated with its infection and its putative vectors remain unknown.

Resumo Hemoplasmas são bactérias epieritrocíticas que infectam mamíferos. 'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' foi detectado previamente em gambás-de-orelha-branca (Didelphis albiventris) das regiões sul e centro-oeste do Brasil. O presente estudo objetivou: i) triar os gambás para as doenças transmitidas por carrapatos (Piroplasmida e Anaplasmataceae); e ii) detectar e caracterizar as espécies de hemoplasma que infectam gambás nas cidades de Curitiba e Foz do Iguaçu, no Estado do Paraná, sul do Brasil. Trinta amostras de sangue de gambás-de-orelha-branca foram analisadas por PCR. Os animais não estavam infestados por ectoparasitos. O gene endógeno de mamífero gapdh foi amplificado em todas as amostras. Todos os gambás testaram negativos para Theileria/Babesia spp. e Ehrlichia/Anaplasma spp. por PCR, respectivamente, para os genes 18S rRNA e 16S rRNA. Uma PCR gene-específica, baseada no gene 16S rRNA de hemoplasmas, mostrou que três/13 (23,08%; CI 95%: 8,18-50,26%) gambás de Foz do Iguaçu foram positivos para Mycoplasma sp. hemotrópico. Todos os gambás de Curitiba testaram negativos para hemoplasmas. O sequenciamento de fragmentos dos genes 16S e 23S rRNA revelou que os animais estavam infectados pelo 'Ca. M. haemoalbiventris'. Embora 'Ca. M. haemoalbiventris' seja prevalente em gambás no Brasil, os sinais clínicos associados à infecção e os prováveis vetores permanecem desconhecidos.

Building Infestation Index for Aedes aegypti and occurrence of dengue fever in the municipality of Foz do Iguaçu, Paraná, Brazil, from 2001 to 2016

Abstract INTRODUCTION: the Building Infestation Index (BII) uses the Rapid Assay of the Larval Index for Aedes aegypti (LIRAa) to express the relationship between positive and surveyed properties. We evaluated LIRAa and the relationship between the BII and climate variables for dengue cases in Foz do Iguaçu municipality, Paraná. METHODS: Spearman's correlations for mean precipitation, mean temperature, BII, and dengue cases (time lag). RESULTS: positive correlations between BII and cases, and mean temperature and cases at two months. Weak correlation between precipitation and cases at three months. CONCLUSIONS: LIRAa and climate variables correlate with dengue cases.